Анализ на клостридии в инвитро

Анализ кала на клостридии

Анализ на клостридии в инвитро

Полное название анализа: Исследование кала на токсины клостридий (Clostridium Difficile) A и В

Клостридии — это микроорганизмы, относящиеся к группе условно-патогенных. Их основная специализация – переваривание белка. Некоторая часть данного вида микрофлоры практически всегда встречается в кишечнике.При высоком уровне иммунитета количество клостридий не выходит за определенные границы.

При снижении защитных сил организма начинается быстрый рост колонии, что является прямым указанием на развитие патологии.

Что показывает анализ

Основная цель проведения анализа – выявление клостридий в кале и определение уровня их концентрации в кишечнике. Помимо этого, перед постановкой диагноза возникает необходимость обнаружения продуктов жизнедеятельности микроорганизмов. Таких как нейротоксин, энтеротоксин и цитотоксин.

В ходе своей жизнедеятельности данный вид микроорганизмов вырабатывает два типа токсинов: индол и скатол. При их высокой концентрации происходит отравление организма и нарушается работа пищеварительной, кровеносной, нервной систем. В особо тяжелых случаях присутствие огромного числа патогенной флоры становится причиной развития некроза тканей.

Показания к анализу

Анализ кала на клостридии назначается при обнаружении следующих симптомов:

  • Рвота, основными характеристиками которой является обильность и появление пены;
  • Сильные боли в области живота;
  • Повышение температуры до 39 ℃ и выше;
  • Появление диареи;
  • Вздутие живота;
  • Обнаружение следов крови в фекалиях.

Все эти симптомы также характерны и для дисбактериоза, поэтому обследование необходимо для дифференциации одного заболевания от другого.

Подготовка к процедуре

Забор материала необходимо проводить сразу после появления первых симптомов недомогания. В этом случае выявить, чем вызвано ухудшение в состоянии здоровья пациента, нарушением микрофлоры кишечника или продуктами жизнедеятельности клостридий, будет намного проще.

Чтобы получить точный результат анализа, рекомендуется соблюдать ряд правил:

  • Забор кала осуществляется в стерильную емкость, которую можно приобрести в аптеке;
  • При необходимости допускается хранение образца кала в холодильнике в течение непродолжительного времени. Температура при этом не должна быть ниже двух и выше восьми градусов тепла. При нарушении данных условий анализ кала будет считаться недостоверным;
  • За трое суток до обследования необходимо отказаться от приема слабительных препаратов и средств, применяемых для борьбы с глистной инвазией;
  • Из пищи должны быть полностью исключены продукты, вызывающие жидкий стул.

Накануне анализа необходимо отменить прием большей части медицинских препаратов, особенно относящихся к группе антибиотиков. Если пациент принимал лекарства, об этом следует сообщить лаборанту и лечащему врачу.

Причины ложных результатов

Исказить результаты обследования могут такие факторы как:

  • Длительный прием антибиотиков и противомикробных препаратов;
  • Недавно перенесенная простуда;
  • Прием иммуносупрессоров;
  • Наличие в кишечнике воспалительных процессов, не связанных с клостридиями;
  • Прием препаратов, содержащих гормоны.

Изменить значение анализа могут нарушения при хранении и доставке материала в лабораторию, например, при использовании нестерильной емкости или попадании в образец мочи и выделений из половых органов.

Как проводится анализ

Для обнаружения клостридий в кале проводят бактериальный посев флоры. Для этого создают условия, способствующие быстрому росту колонии микроорганизмов. Полученные образцы сравниваются с контрольными.

Наиболее информативным является анализ кала на токсины. В этом случае в кале выявляют присутствие токсинов типа А и В.

Существенным недостатком анализа кала на клостридии является то, что он позволяет с высокой точностью определить наличие бактерий, но не дает представления об их способности вырабатывать токсины. В то время как анализ кала на токсины позволяет прогнозировать дальнейшее развитие заболевания.

Если клостридии будут находиться в кишечнике в виде спор, то анализ кала на токсины не покажет патологии. В этом случае результат может быть положительным лишь повторном обследовании через один-два месяца.

Нормы и расшифровка результата

В норме уровень клостридии в кале не должен превышать 105 КОЕ/г. После 60 лет допускается концентрация микроорганизмов доходящая до 106 КОЕ/г. Более высокие значения, полученные в ходе изучения материала, свидетельствуют о начале развития патологического процесса.

Отрицательное значение исследования при наличии симптомов расстройства пищеварения говорит о наличии других видов бактерий и микроорганизмов. В этом случае назначается повторное обследование.

Находясь в состоянии спор, клостридии нечувствительны к действию антибиотиков, поэтому даже при назначенном лечении повторное появление симптомов заболевания не может быть исключено.

Поэтому и после выздоровления иногда назначают повторный контрольный анализ.

Данная статья размещена исключительно с целью ознакомления в познавательных целях и не является научным материалом или профессиональным медицинским советом. За диагностикой и лечением обратитесь к врачу.

Заказать услугу

Хотите заказать услугу или получить подробную консультацию?
Наши специалисты работают круглосуточно и без выходных!

Источник: https://www.medcentrservis.ru/analyses/analiz-kala-na-klostridii/

Раздельное определение токсина А и токсина В Clostridium difficile в кале, антигенный тест (Toxin A and B Clostridium difficile. One step rapid immunосhromotographic assay) – узнать цены на анализ и сдать в Москве

Анализ на клостридии в инвитро

Метод определения Иммунохроматографический.

Исследуемый материал Жидкий кал

Доступен выезд на дом

Clostridium difficile (C. difficile) – анаэробная грамположительная палочка, является основным этиологическим фактором антибиотико-ассоциированной диареи и псевдомембранозного колита. Колонизация кишечника C. difficile характерна для 2% здорового взрослого населения и до 50% детей младше 2 лет, присутствуя как часть обычной флоры.

Но иногда, на фоне лечения других инфекций антибиотиками широкого спектра, баланс микрофлоры нарушается. Более чувствительная нормальная флора элиминируется антибиотиками, а резистентная к ним C. difficile показывает усиленный рост.

Угнетение нормальной флоры и размножение условно-патогенных микроорганизмов может приводить к развитию диареи и/или нарушению целостности кишечного эпителия и воспалению. 

C. difficile продуцирует, как минимум, три фактора, потенциально патогенных для человека. Токсины А и B считаются наиболее важными факторами патогенеза заболеваний, связанных с C. difficile. Токсин А представляет собой энтеротоксин, который влияет на цитоскелет клеток эпителия кишечника, вызывая их дисфункцию. Токсин В – это цитотоксин с выраженным цитопатологическим эффектом. 

Не все штаммы C. difficile продуцируют токсины. Большинство патогенных штаммов продуцируют оба токсина, но есть сообщения о патогенных штаммах C. difficile, продуцирующих только токсин B.

Таким образом, выявление токсина А и В в кале больных с диареей имеет большую диагностическую значимость по сравнению с выделением культур бактерий.

По рекомендациям профессиональных медицинских сообществ при диагностике клостридиоза следует использовать тест-системы для одновременного определения токсинов А и В (суммарное или раздельное определение) C. difficile в кале, что позволяет не пропустить инфицирование штаммами бактерий, продуцирующих только токсин В.

  1. Шелыгин Ю. А. и соавт. Клинические рекомендации Национальной ассоциации специалистов по контролю инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи и общероссийской общественной некоммерческой организации «ассоциации колопроктологов России» по диагностике, лечению и профилактике Clostridium difficile-ассоциированной диареи (CDI). 2017. http://www.gnck.

    ru/rec/recommendation_clostridium_difficile.pdf, https://melitta-uv.ru/media/publications/ 

  2. Козлов Р.С. и соавт. Обзор обновленных практических рекомендаций Американского общества по инфекционным болезням (IDSA) и Американского общества эпидемиологии здравоохранения (SHEA) по инфекциям, вызванным Clostridiumdifficile, у детей и взрослых. КМАХ .2018, Том 20. №2, стр. 76-124.

    http://www.antibiotic.ru/cmac/pdf/cmac.2018.t20.n2.p076.pdf 

  3. Сухина М.А., Сафин А.Л. Современное состояние лабораторной диагностики Clostridium difficileассоциированных диарей; методы детекции токсигенных штаммов Clostridium difficile (Обзор литературы). Клиническая лабораторная диагностика. 2017; 62(10): 635-640. DOI: http://dx.doi.org/10.

    18821/0869-2084-2017-62-10-635-640 https://cyberleninka.ru/article/n/sovremennoe-sostoyanie-laboratornoy-diagnostiki-clostridium-difficile-assotsiirovannyh-diarey-metody-detektsii-toksigennyh-shtammov 

  4. А.В. Шиповской, С.Б. Фадеев. Опыт применения иммуноферментного анализа для диагностики антибиотикоассоциированных диарей.

    Бюллетень Оренбургского научного центра УрО РАН (электронный журнал), 2013, №1, стр. 1-8. https://cyberleninka.ru/article/n/opyt-primeneniya-immunofermentnogo-analiza-dlya-diagnostiki-antibiotikoassotsiirovannyh-diarey 

  5. Н.В. Дмитриева, И.А. Ключникова, И.И. Шильникова. Clostridium difficile-ассоциированная диарея (обзор литературы). Сибирский онкологический журнал, 2014.

    № 1 (61), стр. 46-53. https://cyberleninka.ru/article/v/clostridium-difficileassotsiirovannaya-diareya  

  6. А.В. Щербакова, С.К. Аджигайтканова, Н.Г. Потешкина. Clostridium difficile-ассоциированный колит: обзор рекомендаций. Лечебное дело, №3, 2014, стр. 20-24. https://cyberleninka.

    ru/article/v/clostridium-difficile-assotsiirovannyy-kolit-obzor-rekomendatsiy 

  7. Игорь Карпов и соавт. Clostridium difficile-ассоциированная инфекция. Медвестник, 2016. .http://www.medvestnik.by/ru/sovremennii_podxod/view/clostridium-difficile-assotsiirovannaja-infektsija-15999-2016/ 
  8. Заплатников А.Л., Захарова И.Н., Коровина Н.А. Clostridium difficile-инфекция у детей.

    «РМЖ» №5 от 06.03.2004 стр.373. https://www.rmj.ru/articles/pediatriya/Clostridium_difficile-infekciya_u_detey/ 

  9. LabTests Online. AACC. Clostridium difficile and C. diff Toxin Testing. https://labtestsonline.org/

Источник: https://www.invitro.ru/analizes/for-doctors/542/59020/

Определение токсинов A и B Clostridium difficile

Анализ на клостридии в инвитро

[10-068] Определение токсинов A и B Clostridium difficile

1250 руб.

Clostridium difficile – это анаэробная грамположительная бацилла, которая является основной причиной антибиотико-ассоциированной диареи и псевдомембранозного колита в лечебных учреждениях.

Продуцируемый бактерией C. difficile специфический энтеротоксин (токсин А) повреждает слизистую оболочку кишечника, вызывает развитие воспалительного процесса в ней, усиливает секрецию жидкости.

Синонимы русские

Антигены бактерий в кале, Клостридиум диффициле.

Синонимы английские

The definition of toxin A Clostridium difficile.

Метод исследования

Иммунохроматография.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Общая информация об исследовании

Clostridium difficile (C. difficile) – это анаэробная, грамположительная спорообразующая бактерия, которая вызывает инфекционную диарею и псевдомембранозный колит. Чаще всего подвержены заражению C. difficile пациенты старше 65 лет, находящиеся на стационарном лечении и получающие антибактериальную терапию (или после курса антибактериальной терапии).

У данных пациентов наблюдается снижение иммунитета к C. difficile вследствие возрастного компонента, наличия сопутствующих заболеваний, а также изменения микрофлоры кишечника после воздействия антибиотиков. Большинство эпидемий возникают в условиях стационара и в учреждениях долгосрочного ухода. С появлением гипервирулентных штаммов C.

difficile стали нередкими случаи заражения молодых пациентов с неизменённым иммунитетом.

C. difficile у людей колонизирует толстый кишечник. Существуют как токсигенные, так и нетоксичные штаммы, но только токсигенные вызывают заболевания у людей. Патогенность зависит от наличия одного или двух, вызывающих диарею, токсинов: токсина А и токсина В.

Все токсигенные штаммы содержат токсин В, совместно с токсином А или без него. Оба токсина ведут к гибели клеток кишечника, стимулируют воспалительную реакцию, которая усугубляет повреждение тканей, вызывает диарею и псевдомембранозный колит.

Существует также третий – бинарный токсин, который повышает вирулентность C. difficile.

Способность C. difficile вызывать воспаление кишечника основывается на двух факторах: высокая способность к колонизации и иммунный ответ пациента.

Толстый кишечник защищен местной флорой, состоящей из 4000 видов бактерий, которые в совокупности обеспечивают устойчивость к колонизации патогенных видов путем конкуренции за основные питательные вещества и места прикрепления к стенке кишечника.

Антибиотики нарушают барьерную микрофлору и уменьшают защиту от колонизации патогенных микроорганизмов.

Клинические проявления заражения C. difficile варьируются в широком спектре: от бессимптомного состояния носителя до токсического мегаколона. Типичные признаки и симптомы острой инфекции включают диарею (более 3 раз неоформленного стула в сутки), анорексию, тошноту; в общем анализе крови лейкоцитоз. Тяжелое течение характеризуется гипоальбуминемией, высоким лейкоцитозом в крови.

Лабораторная и инструментальная диагностика клостридиальной инфекции осуществляется несколькими способами. Наиболее широко распространенным является иммуноферментный анализ с определением токсина А и токсина В Clostridium difficile в кале. Чувствительность метода составляет 75-95 %, специфичность 83-98 %.

Из других методов можно отметить полимеразную цепную реакцию для токсигенного штамма C. difficile, исследование глутаматдегидрогеназы C. difficile, колоноскопию (с выявлением картины псевдомембранозного колита), морфологическую диагностику (гистологическое исследование биоптатов кишечника), посев на C.

difficile.

Когда назначается исследование?

  • Развитие диареи у пациентов, получавших антибиотики в предшествующие 2 месяца, а также диареи, развившейся спустя 72 часа после госпитализации;
  • при подозрении на псевдомембранозный колит у пациентов, относящихся к группе высокого риска: возраст старше 65 лет, длительная госпитализация (особенно пребывание в ОРИТ), оперативные вмешательства, наличие злокачественных опухолей, почечной недостаточности, воспалительные заболевания толстой кишки, химиотерапия, прием ингибиторов протонной помпы, гипоальбуминемия, энтеральное питание, ишемия кишки;
  • наиболее часто С. difficile – ассоциированный колит развивается после применения клиндамицина или линкомицина (до 6 %), полусинтетических пенициллинов (5-9 %), цефалоспоринов с широким спектром действия.

Что означают результаты?

Референсные значения

Компонент Референсные значения
Токсин A Clostridium difficileотрицательно
Токсин B Clostridium difficileотрицательно

Как и при всех диагностических процедурах in vitro, результаты теста должны интерпретироваться только с учетом общей клинической картины и других методов диагностики.

Отрицательный результат теста не исключает заражения C. difficile, он может быть обусловлен протеолитическим разложением токсинов из-за неправильного хранения пробы. При подозрении на инфекцию следует повторить исследование – протестировать другую пробу кала.

Положительный результат теста не исключает присутствия других патогенов.

Присутствие в пробах кала значительных количеств крови может в ряде случаев привести к ложноположительным результатам.



Важные замечания

  • Тест не должен применяться в следующих ситуациях:
    • у детей в возрасте до 1 года в связи с высоким процентом ложноположительных результатов в данной возрастной группе;
    • для контроля эффективности лечения, так как у некоторых пациентов еще длительное время после клинического выздоровления в кале обнаруживается токсин C. difficile.
  • Через неделю с момента заражения число паразитов в фекалиях снижается, что приводит к снижению чувствительности теста. Образцы кала для анализа должны быть собраны в течение одной недели с момента появления симптомов заболевания.

Также рекомендуется

[02-056] Анализ кала на яйца и личинки гельминтов, простейшие и их цисты (Parasep)

Литература

  • Burke KE, Lamont JT. Clostridium difficile infection: a worldwide disease. / Gut Liver. 2014 Jan;8(1):1-6.
  • Ardeshir Rineh, Michael J Kelso, Fatma Vatansever, George P Tegos, Michael R Hamblin. Clostridium difficile infection: molecular pathogenesis and novel therapeutics. / Expert Rev Anti Infect Ther. 2014 Jan; 12(1): 131–150.
  • Ивашкин В.Т., Ющук Н.Д., Маев И.В., Лапина Т.Л., Полуэктова Е.А., Шифрин О.С., Тертычный А.С., Трухманов А.С., Шептулин А.А., Баранская Е.К., Ляшенко О.С., Ивашкин К.В. Рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению Clostridiumdifficile-ассоциированной болезни. / Российский Журнал Гастроэнтерологии, Гепатологии, Колопроктологии. 2016;26(5):56-65.

Источник: https://helix.ru/kb/item/10-068

Поделиться:
Нет комментариев

    Добавить комментарий

    Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.